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Biorbyt 文献 / Nature 子刊:COVID-19 患者对 SARS-CoV-2 的抗体应答!

发布时间:2020-10-16 10:03 点击次数:

新型冠状病毒施虐之际,英国 biorbyt 作为全球最大的生物科研试剂供应商之一,为支持新型肺炎/新型冠状病毒的研究,发起了向全国所有参与新型冠状病毒研究的高校、科研机构、医院实验室和企业免费提供 SARS 科研蛋白抗原和抗体的活动。

来自中国重庆医科大学传染病分子生物学重点实验室等的研究人员最近在 Nature Medicine 上发表的论文中指出:COVID-19 患者对 SARS-CoV-2 表现出急性抗体反应。在出现症状后 19 天内, 100% 的患者检测到抗病毒免疫球蛋白 G (IgG) 阳性。这表明血清学检查有助于诊断 RT—PCR 结果阴性的疑似患者和鉴别无症状感染。该研究中使用到了 biorbyt 提供的 SARS-CoV  核衣壳重组蛋白。

 

文章名称:Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients with COVID-19
作者:Quan-Xin Long, Bai-Zhong Liu, Hai-Jun Deng, Gui-Cheng Wu, Kun Deng, Yao-Kai Chen 等
文献链接:https://www.nature.com/articles/s41591-020-0897-1

使用产品:biorbyt orb82478 SARS-CoV, Nucleocapsid, recombinant protein
产品链接:https://www.biorbyt.com/sars-cov-nucleocapsid-recomb-orb82478.html

文章概要研究报告了 285 例 COVID-19 患者对 SARS-CoV-2 的急性抗体反应。在出现症状后 19 天内, 100% 的患者检测到抗病毒免疫球蛋白 G (IgG) 阳性。IgG 和 IgM 的血清转化是同时发生或顺序发生的。IgG 和 IgM 均在血清转化后 6 天内滴度达到平均数。血清学检查有助于诊断 RT—PCR 结果阴性的疑似患者和鉴别无症状感染。

文章赏析 

2019 年冠状病毒疾病(COVID-19)的持续传播引起了全世界的广泛关注,世界卫生组织(WHO)于 2020 年 3 月 11 日宣布 COVID-19 成为大流行病。对严重急性呼吸系统综合症(SARS)和中东呼吸系统综合症(MERS)的研究表明,在症状发作后 2 周,在 80-100% 的患者中可检测到病毒特异性抗体。目前,对 SARS-CoV-2 的抗体反应仍知之甚少,血清学检测的临床用途尚不清楚。

来自三家指定医院的总共 285 名 COVID-19 患者参加了这项研究,在这些患者中,有 70 名具有顺序样本。我们使用磁化学发光酶免疫分析(MCLIA)进行病毒特异性抗体检测。来自 COVID-19 患者的血清样品显示未与 SARS-CoV spike 抗原的 S1 亚基交叉结合,但是观察到了与 SARS-CoV 的 nucleocapsid  抗原的交叉反应。

病毒特异性 IgG 阳性的患者比例在症状发作后约 17-19 天达到 100%,而病毒特异性 IgM 阳性的患者比例在症状发作后约 20-22 天达到 94.1% 的峰值。在症状发作后的前 3 周内,病毒特异性 IgG 和 IgM 抗体滴度有所增加。然而,与 ≤ 3 周组相比,>3 周组 IgM 略有下降。严重组的 IgG 和 IgM 滴度高于非严重组,尽管仅在症状发作后两周的 IgG 滴度中观察到了显着差异。

对 63 例确诊 COVID-19 的患者进行随访,直至出院。每隔三天收集一次血清样品。其中,随访期间总体血清转化率为 96.8%(61/63),两名母亲和女儿在住院期间维持 IgG 和 IgM 阴性状态。可对 26 例患者进行血清学检查,这些患者最初是血清阴性的,然后在观察期内进行了血清转化。所有这些患者在症状发作后的 20 天内都达到了 IgG 或 IgM 的血清转化。IgG 和 IgM 血清转换的时间平均是症状发作后的 13 天。观察到三种类型的血清转化:IgG 和 IgM 的同步血清转化(9 例患者),比 IgG 早的 IgM 血清转化(7 例患者)和晚于 IgG 的 IgM 血清转化(10 例患者)。

我们分析了 WHO 建议的确认 MERS-CoV 感染的标准,包括(1)血清转化或(2)IgG 特异性抗体滴度提高四倍,是否适合诊断 COVID-19。在疾病的第一周中,IgG 最初呈血清反应阴性的患者中,有 51.2%(21/41)发生了血清转化。在患病的第一周,共有 18 例患者血清阳性。其中,八名患者的病毒特异性 IgG 滴度增加了四倍。总体而言,COVID-19 的患者中有 70.7%(29/41)达到了 IgG 血清转化和/或 IgG 滴度增加四倍或更高的标准。

为了调查血清学检测是否可以帮助识别 COVID-19 的患者,我们筛选了 52 例表现出 COVID-19 症状或放射学结果异常且在至少两个连续样本中病毒 RNA 阴性的患者。在 52 个疑似病例中,有四个在初始样本中具有病毒特异性 IgG 或 IgM。初始血清学检测后 3 天,患者 3 的 IgG 滴度增加了四倍以上。有趣的是,3 号患者在两次抗体测量之间还通过聚合酶链反应和逆转录(RT-PCR)检测病毒感染呈阳性。在来自患者 1 的三个连续样本中,IgM 滴度增加(<4 倍)。患者 4 的 IgG 和 IgM 滴度比两个连续样本中的临界值高 100 倍。患者 2 的病毒特异性 IgG 和 IgM 均为阳性。症状出现后 2 周收集的连续样本中 IgG 和/或 IgM 升高,或者单个样本中出现阳性结果,表明这三名患者感染了 SARS-CoV-2。

我们进一步证明了血清学测试在 164 例已知 COVID-19 患者的近距离接触的监测中的应用。RT-PCR 证实有 16 个人感染了 SARS-CoV-2,其中 3 例没有症状。其他 148 个人的 RT-PCR 结果阴性,没有症状。暴露后约 30 天从这 164 个人收集血清样品进行抗体测试。16 例经 RT-PCR 确诊的病例均为病毒特异性 IgG 和/或 IgM 阳性。此外,在 RT-PCR 结果阴性的 148 个人中,有 7 个人具有病毒特异性 IgG 和/或 IgM 阳性,这表明核酸测试漏掉了 4.3%(7/164)的紧密接触。164 位病毒特异性 IgG 和/或 IgM 阳性的近距离接触者中有 10 位无症状。

我们的研究表明,确认 MERS-CoV 感染的标准适用于大多数 COVID-19 患者。但是,对于某些满足这些标准的患者,需要尽早收集第一份血清样品,因为在症状发作后 7 天内,有 12.2%(5/41)的患者 IgG 滴度已经达到稳定。对于那些在理想时段内未进行采样的患者,将需要进行反复的血清学检查,以确认对 SARS-CoV-2 感染的抗体反应。

我们的研究仍有一些限制。首先,我们没有测试样品的病毒中和作用,因此未知检测到的 IgG 抗体的中和活性。其次,由于处于严重和危急状况的患者的样本量较小,因此难以确定抗体反应与临床病程之间的关联。

基于 RT–PCR 的病毒 RNA 检测灵敏,可以有效地确认早期 SARS-CoV2 感染。我们的数据表明,针对 COVID-19 的病毒特异性抗体检测可能很重要(1)作为核酸检测的补充,可用于诊断 RT-PCR 结果阴性的可疑病例,以及(2)调查近距离接触者的无症状感染。借助血清学检测尽早确认可疑的 COVID-19 病例可以减少重复采样期间的暴露风险,并节省宝贵的 RT-PCR 检测。在我们的小规模调查中,有 7 例核酸结果阴性且无症状的 IgG 和/或 IgM 阳性。这突出了进行血清学检测以更准确估计 COVID-19 大流行程度的重要性。

 

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