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KLH偶联：为何成为抗体制备中“不可替代”的标配？
52 人阅读发布时间：2025-12-08 09:16
翻抗体说明书时，“免疫原”那栏十有八九写着 “KLH-conjugated synthetic peptide”。几乎每个合成肽抗体都这么干。
你有没有想过：为什么？不偶联KLH行不行？偶联别的蛋白（比如BSA）不是更便宜？
但一段10-20个氨基酸的短肽，分子太小、结构太简单，打到动物体内，免疫系统压根懒得搭理，直接当垃圾清理了。
答案：给这个“小靶子”绑上一个免疫系统绝对无法忽视的“超级信号弹”。
这个信号弹，就是 KLH（钥孔血蓝蛋白）。
KLH从海洋贝类血里提取，对兔子、小鼠来说，是彻头彻尾的“外星异物”。免疫系统一见到它，立刻 “全员警戒，全力攻击”。这种强烈反应，能完美带动连在它身上的那个小肽一起被识别。
KLH是个大复杂蛋白，上面有很多能激活关键免疫细胞（辅助T细胞）的位点。这些被激活的细胞，会协助B细胞针对连在KLH上的你的目标肽，产生高质量抗体（尤其是IgG）。没有这个“助攻”，好抗体出不来。
KLH跟你的实验样本（人、鼠、大鼠的组织或细胞）八竿子打不着。所以，产生的抗体只认你的目标肽，不会去乱认样本里其他蛋白。
这就从源头上杜绝了因载体蛋白引起的非特异性背景。
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胎牛血清（几乎每个细胞房都有）
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很多细胞培养液里
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甚至有些实验用的封闭剂里
如果你的抗体是用 BSA-肽段 免疫出来的，那么这支抗体大军可能兵分两路：一路打你的目标蛋白，另一路打无处不在的BSA。
后果就是：你的Western Blot出现诡异杂带，你的免疫荧光背景一片亮白，你的IHC染色说不清是哪来的信号。你的实验会被莫名其妙的背景噪音彻底毁掉。
BSA 像一辆沿途不断搭载乘客（各种BSA杂质）的公交车，终点站一片混乱。
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这是个规范操作，厂商在认真做抗体。
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同时，去找有没有提供“免疫原序列”。能提供确切序列（比如产品页写“可联系我们获取序列”）的厂商更靠谱。有了序列，你就能做最权威的验证实验——肽段竞争实验（用游离肽段能中和掉抗体信号），这是证明抗体特异性的黄金标准之一。