细胞的生命活动依赖于其“细胞器”有条不紊地发挥各自的功能，不同细胞形态各异，细胞器组成上有一定的差异，但是主要细胞器组成单元是一样的。

          动物细胞的细胞器主要包括: 线粒体，核糖体，内质网，高尔基体，溶酶体等。在免疫印迹及免疫荧光实验中，常常需要选择特征蛋白作为特定细胞器的标志物，或确认蛋白在细胞器上的定位，这些标志物通常与细胞器的特定功能密切相关。

Biorbyt为您整理了不同细胞器的标志物，并为您提供用于检测各标志物的的抗体产品：

       这些细胞器的标志物，其实就是内参蛋白。

        在Western Blotting中使用内参，就是在WB过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达。由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。

在Western Blotting实验过程中，使用内参的方法通常有以下三种：

1，是超级简便的标记内参使用法，只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。

2，普通内参，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测，然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。

3，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开，然后两块膜分别与内参蛋白抗体和目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。因此要根据检测的蛋白的分子量来选择合适的内参!

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